Πώς η λυοφιλοποίηση διατηρεί το βιολογικό υλικό

Η λυοφιλοποίηση, επίσης γνωστή ως ξήρανση με κατάψυξη, είναι μια διαδικασία που χρησιμοποιείται για τη διατήρηση βιολογικού υλικού με απομάκρυνση του νερού από το δείγμα, η οποία περιλαμβάνει πρώτα την κατάψυξη του δείγματος και κατόπιν την ξήρανσή του υπό κενό σε πολύ χαμηλές θερμοκρασίες. Τα λυοφιλοποιημένα δείγματα μπορούν να αποθηκευτούν πολύ περισσότερο από τα μη επεξεργασμένα δείγματα.

Γιατί χρησιμοποιείται λυοφιλοποίηση

Η λυοφιλοποίηση ή η ξήρανση με κατάψυξη των βακτηριακών καλλιεργειών σταθεροποιεί τις καλλιέργειες για μακροχρόνια αποθήκευση ελαχιστοποιώντας παράλληλα τη ζημία που μπορεί να προκληθεί από την αυστηρή ξήρανση του δείγματος. Πολλοί μικροοργανισμοί επιβιώνουν καλά όταν λυοφιλοποιούνται και μπορούν εύκολα να επανυδατωθούν και να αναπτυχθούν σε μέσα καλλιέργειας μετά από παρατεταμένες χρονικές περιόδους αποθήκευσης.

Η λυοφιλοποίηση χρησιμοποιείται επίσης στις βιομηχανίες βιοτεχνολογίας και βιοϊατρικής για τη διατήρηση εμβολίων, δειγμάτων αίματος, καθαρισμένων πρωτεϊνών και άλλων βιολογικών υλικών.

Αυτή η σύντομη εργαστηριακή διαδικασία μπορεί να χρησιμοποιηθεί με οποιοδήποτε εμπορικά διαθέσιμο στεγνωτήριο για να διατηρηθεί η συλλογή σας καλλιέργειας.

Η Διαδικασία Λυοφιλοποίησης

Η διαδικασία λυοφιλοποίησης είναι στην πραγματικότητα μια εφαρμογή ενός φυσικού φαινομένου που ονομάζεται εξάχνωση: η μετάβαση μιας ουσίας από στερεό σε αέρια κατάσταση, χωρίς πρώτα να διέλθει από την υγρή φάση. Κατά τη διάρκεια της λυοφιλοποίησης, το νερό στο κατεψυγμένο δείγμα απομακρύνεται ως υδρατμοί, χωρίς πρώτα να ξεπαγώσει το δείγμα.

Κοινά λάθη

Ένα από τα πιο συνηθισμένα λάθη όταν πρόκειται για λυοφιλοποίηση δεν είναι η γνώση του σημείου τήξης του δείγματος σας, γεγονός που καθιστά δύσκολη την επιλογή του σωστού λυοφιλοποιητή. Τα δείγματα σας μπορεί να λιώσουν κατά τη διάρκεια της διαδικασίας. Ένα άλλο συνηθισμένο λάθος είναι ότι η ψυχρότερη σκέψη είναι καλύτερη όταν ξηραίνεται με κατάψυξη σε ένα στεγνωτήριο ψύξης τύπου ράφι. Κατά την αρχική ξήρανση, θα πρέπει να ρυθμίσετε τη θερμοκρασία του ραφιού ακριβώς κάτω από την ευτηκτική θερμοκρασία του δείγματος. Θα πρέπει να υπάρχει αρκετή θερμότητα για να ενθαρρυνθούν τα μόρια του δείγματος να κινηθούν - αλλά να αποφευχθεί η τήξη.

Ένα τρίτο λάθος είναι να χρησιμοποιήσετε λάθος εξοπλισμό για τα δείγματα σας. Επειδή οι ξηραντές κατάψυξης χρησιμοποιούνται σε μια ρύθμιση ομάδας, θα πρέπει να γνωρίζετε τα ακόλουθα πριν αγοράσετε ένα:

• Πόση υγρασία θα λυοφιλοποιηθεί
• Τι είναι το δείγμα (και η ευτηκτική θερμοκρασία)
• Πώς να χρησιμοποιήσετε σωστά το στεγνωτήριο

Εάν η μονάδα δεν χρησιμοποιείται σωστά, θα μπορούσε να καταστρέψει όλα τα δείγματα. Αυτό μας φέρνει σε ένα άλλο κοινό λάθος: Δεν συντηρούμε την αντλία κενού. Η αντλία πρέπει να είναι σε άριστη κατάσταση λειτουργίας για να λειτουργήσει η λυοφιλοποίηση. Η λειτουργία της αντλίας με το έρμα αερίου ανοιχτό 30 λεπτά πριν και μετά τη διαδικασία ξηράνσεως με κατάψυξη θα αυξήσει τη διάρκεια ζωής της αντλίας. Το άνοιγμα του έρματος αερίου καθαρίζει τους ρύπους από την αντλία για να αποφευχθεί η βλάβη των εσωτερικών εξαρτημάτων. Πρέπει να ελέγξετε το λάδι της αντλίας συχνά για αποχρωματισμό και σωματίδια και να αλλάξετε το λάδι ανάλογα με τις ανάγκες.

Οι κανονικές αλλαγές λαδιού κρατούν την αντλία τραβώντας το βέλτιστο κενό κατά τη διάρκεια της διαδικασίας ξηρής ψύξης.

Τέλος, η ύπαρξη εσφαλμένων εξαρτημάτων ξήρανσης κατά τη λυοφιλοποίηση μπορεί επίσης να είναι ένα μεγάλο λάθος. Χρειάζεστε ένα δείγμα πώματος κάτω από το κενό σας; Στη συνέχεια απαιτείται θάλαμος διακοπής. Λυπάτε ξήρανση σε φιάλες; Στη συνέχεια, βεβαιωθείτε ότι έχετε ένα θάλαμο ξήρανσης με θύρες.

Αποφεύγοντας τα παραπάνω λάθη, μπορείτε να παρέχετε καλύτερη φροντίδα για το στεγνωτήριο και την αντλία σας και να έχετε καλύτερα δείγματα όταν γίνεται η ξήρανση με κατάψυξη.

_{βιβλιογραφικές αναφορές}

_{Labconco News. "Κορυφαία 5 λάθη που έγιναν κατά τη διαδικασία λυοφιλοποίησης." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-sciences}